Edifício dos séculos XV e XVI, de estilo manuelino-mudejar e renascentista construído em substituição de um anterior templo gótico, do qual subsistem ainda alguns vestígios. Teve anexo o Palácio Real e foi considerada como Igreja Real, na qual se realizaram importantes cerimónias, como o casamento do príncipe D. Afonso com D. Isabel de Castela, em 1490. A maior curiosidade popular reside na Capela dos Ossos, revestida por ossadas humanas (século XVII), com a intenção de provocar a reflexão sobre a transitoriedade da vida humana. Aqui encontra-se sepultado o primeiro grande dramaturgo português, Gil Vicente (1536).